Evaluation of Antisera to an Inhibitor of Virus Replication (IVR)

Abstract

Antisera to an inhibitor of virus replication (IVR) were prepared. The two biologically active fractions — IVR‐1 (MW 26,000) and IVR‐2 (MW 57,000) were either mixed or used separately for injection into rabbits. The mixed antiserum enabled a clear distinction in ELISA and in agar gel diffusion tests between preparations of IVR from the incubation medium of tobacco mosaic virus (TMV)‐infected protoplasts, and the preparation obtained from control protoplasts. Antisera prepared against each of the two fractions were highly cross‐reactive in both ELISA and agar‐gel diffusion tests. The mixed IVR antiserum totally abolished the inhibitory activity of IVR, whereas normal antiserum had no effect on its biological activity. IVR antiserum did not react with TMV, TMV coat protein, human leukocyte interferon, or the antiviral factor (AVF). These results strengthen our previous suggestion that IVR‐2 is a dimer of IVR‐1.Zusammenfassung: Bewertung von Antiseren gegen einen Inhibitor der Virusreplikation (IVR)Hergestellt wurden Antiseren gegen einen Inhibitor der Virusreplikation (IVR). Die zwei biologisch aktiven Fraktionen — IVR‐1 (MGew. 26000) und IVR‐2 (MGew. 57000) — wurden entweder zusammen oder allein in Kaninchen injiziert. Das gemischte Antiserum ermöglicht, nach ELISA oder Agargeldiffusionstests, daß IVR‐Präparationen aus dem Inkubationsmedium von Tabak Mosaik Virus (TMV)‐infizierten Protoplasten und die von Kontrollprotoplasten voneinander deutlich unterschieden werden konnten. Antiseren, die gegen die zwei Fraktionen hergestellt wurden, hatten eine hohe Kreuzreaktion in ELISA und Agargeldiffusionstests. Das gemischte IVR‐Antiserum annullierte total die hemmende Aktivität der IVR, normales Antiserum dagegen beeinflußt derenbiologische Aktivität nicht. Das IVR‐Antiserum reagierte nicht mit TMV, TMV‐Hülleprotein, menschlichem Leukozyteninterferon oder dem Antivirusfaktor. Diese Ergebnisse bestätigen unsere frühere Hypothese, daß IVR‐2 ein Dimer des IVR‐1 ist.