Nachweis von Östrogenrückständen in Fleisch durch Dünnschichtchromatographie und Fluorimetrie

Abstract

Es wird eine Methode zur qualitativen und quantitativen Bestimmung von sechs anabolen Wirkstoffen beschrieben. Der Analysengang umfaß folgende Einzelschritte: Zerkleinern der Probe, anschließend homogenisieren in Tetrahydrofuran, Verteilung zwischen Natronlauge und Petroläther/Benzol, Chromatographic der Östrogenfraktion über Sephadex LH-20, Derivatisierung mit Dansylchlorid mit folgender eindimensionaler Dünnschichtchromatographie. Qualitativer Nachweis auf der Dünnschichtplatte bei 366 nm unter der UV-Lampe, quantitative fluorimetrische Bestimmung nach Elution des entsprechenden Substanzfleckes von der Dünnschichtplatte oder durch direkte remissionsfluorimetrische Messung auf der Dünnschichtplatte. Die Nachweisgrenze der qualitativen Bestimmung beträgt 5–10 ppb, die quantitative Bestimmung ist ab 20–50 ppb möglich. A new method for the qualitative and quantitative determination of six anabolic substances is described. The analytical procedure consists of the following steps: comminution of the meat sample; homogenisation with tetrahydrofurane; liquid-liquid partition between sodium hydroxide solution and petroleum ether/benzene; chromatography of the estrogen containing fraction on Sephadex LH-20; derivatization with Dansyl chloride; and finally thin layer chromatography. The qualitative estimation on the TLC-plate is performed with 366 nm ultra violet light. The quantitative determination is carried out either by fluorimetry after elution of the substances from the plate, or by means of a remission spectral fluorimeter directly on the plate. The detection limit of the qualitative estimation in meat extracts was 5–10 ppb. A minimum concentration of 20–50 ppb is necessary for quantitative determination.