Determination of Clozapine and its Major Metabolites in Serum Samples of Adolescent Schizophrenic Patients by High-Performance Liquid Chromatography - Data from a Prospective Clinical Trial
This report describes a method for determination of clozapine and its major metabolites N-desmethylclozapine and clozapine N-oxide in serum samples of adolescent schizophrenic patients during maintenance therapy. The method includes deproteinization and subsequent high-performance liquid chromatography with electrochemical detection. The method shows sufficient sensitivity to quantitate clozapine, clozapine N-oxide and N-desmethylclozapine accurately at 0.5, 5, and 0.5 ng/ml, respectively. We were able to demonstrate for 16 patients receiving fixed doses of clozapine that the individual mean values calculated from six consecutive measurements revealed a strong linear dosage and serum level relationship (Pearson's coefficient of correlation): clozapine (r = 0.82, p = 0.0001); N-desmethylclozapine (r = 0.81, p = 0.0001); clozapine N-oxide (r = 0.91; p = 0.0001). Preliminary pharmacokinetic data are presented and dose-response relationship are discussed. Die vorliegende Untersuchung beschreibt eine Bestimmungsmethode für Clozapin und seine Hauptmetabolite N-Desmethylclozapin und Clozapin-N-oxid im Serum von an einer Schizophrenie erkrankten Jugendlichen unter Erhaltungstherapie. Die Methode basiert auf einer Extraktion mittels Proteinfällung und der anschließenden HPLC-Bestimmung mit elektrochemischer Detektion. Clozapin und sein Metabolit N-Desmethylclozapin können dabei bis zu einem Bereich von 0,5 ng/ml und Clozapin-N-oxid bis zu 5 ng/ml sicher detektiert werden. Die auf 16 Patienten mit konstanter Dosis bezogenen Mittelwerte aus sechs Untersuchungen in Abständen von sechs Wochen zeigen, daß zwischen den applizierten Dosen von Clozapin und den gemessenen Serumspiegeln des Neuroleptikums und seiner beiden Metabolite eine höchst signifikante lineare Beziehung besteht (Produkt-Moment-Korrelation nach Pearson): Clozapin (r = 0,82, p = 0,0001); N-Desmethylclozapin (r = 0,81, p = 0,0001); Clozapin-N-oxid (r = 0,91; p = 0,0001). Es werden erste Ergebnisse von pharmakokinetischen Untersuchungen vorgestellt und Dosiswirkungsbeziehungen diskutiert.