Histochemical and immunohistochemical techniques on acrylate embedded bone biopsies

Abstract

Till present the advantages of methacrylate embedded bone biopsies for the diagnosis of haemoblastic disorders have been somewhat restricted. This was as a result of the impossibility to apply histochemical methods and other sensitive staining procedures to semithin sections. A routine method is described whereby enzyme activity, excellent fixation and good sectioning ability are retained. Fixation is carried out using 4% purified formaldehyde buffered in 0.1M sodium cacodylate. Dehydration is done with a water-miscible glycolmethacrylate. Naphthol-AS-D-chloroacetate esterase activity can be observed in granules of the entire neutrophil cell lineage. By use of this method it becomes possible to demonstrate acid phosphatase activity and immunoglobulins in atypical plasma cells of multiple myeloma. A considerable decrease in processing time, as well as a preservation of enzyme activity during the postal mailing of fixed tissue samples from outside are further advantages. Alle Vorteile der in Methacrylat eingebetteten Myelotomiezylinder für die Differentialdiagnose von HÄmoblastosen wurden bisher durch die Unmöglichkeit betrÄchtlich eingeschrÄnkt, an Semidünnschnitten histochemische Reaktionen oder differenziertere FÄrbemethoden durchzuführen. Eine routinemÄ\ig anwendbare Methode wird beschrieben, bei der EnzymaktivitÄten, eine ausgezeichnete Fixierung und eine sehr gute SchneidequalitÄt erhalten werden. Die Fixierung erfolgt in 4proz., gereinigtem Formaldehyd, der in 0,1M Natriumkakodylatpuffer gelöst ist, die EntwÄsserung über ein wasserlösliches Gemisch aus Glykolacrylaten und die Einbettung in Methacrylat. Die AktivitÄt der Naphthol-ASD-chloracetat-Esterase kann in den spezifischen Granula der gesamten granulopoetischen Reihe nachgewiesen werden. Die Darstellung der sauren Phosphatase und der Immunglobulindepots in atypischen Plasmazellen beim multiplen Myelom gelingt leicht. Eine betrÄchtliche Verkürzung der Herstellungszeit der SchnittprÄparate sowie die Möglichkeit, auch an von auswÄrts eingesandten Myelotomiezylindern noch enzymatische Reaktionen durchzuführen, sind weitere Vorteile dieser neuen Methode.