Problematik der Dextran-Aktivkohletrennung von freiem und gebundenem Steroid im direkten Progesteronradioimmunoassay ohne Chromatographie und Extraktion

Abstract

A method for radioimmunoassay of serum progesterone is described which does not require extraction. A chromatographie step is not necessary because of the high specifity of the antibody. The intraassay coefficient of variation was 6.1% and the interassay coefficient of variation was 8.4%. The detection limit was 10 pg/tube that means 1 ng/ml serum. The test on parallelity was correct up to 10 μl serum. The results compared with results of a radioimmunoassay with extraction were identical. High concentrations of hormone in serum and an antibody of high specifity are required for the direct radioimmunoassay of steroids. Using the dextran-charcoal-system for separation of free from antibody-bound steroid the relationship of the quantity of serum to the quantity of charcoal is of great importance. These problems are discussed. Es wird eine radioimmunologische Methode für die Messung von Progesteron im Serum beschrieben, die ein direktes Einsetzen des Serums ohne vorherige Extraktion des Steroids erlaubt. Ein chromatographischer Trennungsschritt entfällt auf Grund der hohen Spezifität des Antikörpers. Der Intraassay-Variationskoeffizient betrug 6,1%, der Interassay-Variationskoeffizient 8,4%. Die Wiederfindungsgrenze lag bei 10 pg/Ansatz bzw. 1 ng/ml Serum. Die Kontrolle auf Parallelität ergab ein korrektes Verhalten bis 10 μl Serum. Ermittelte Serumwerte wurden mit einem Extraktionsradioimmunoassay verglichen und ergaben identische Ergebnisse. Die Voraussetzungen für einen direkten Steroidradioimmunoassay sind eine hohe Serumkonzentration des Hormons und ein hochspezifischer Antikörper. Bei Verwendung des Dextran-Aktivkohlesystems zur Trennung von freiem und gebundenem Steroid ist das Verhältnis von eingesetzter Serummenge zur Aktivkohlemenge von entscheidender Bedeutung. Diese Problematik wird diskutiert.