Abstract
Durch schwaches Zentrifugieren gewonnenes thrombozytenhaltiges Oxalatplasma wird mit Pufferlösung pH 6,7 verdünnt, Kalziumchlorid hinzugegeben und das Gemisch bei 37° C in silikoniertem Glasröhrchen inkubiert. Nach sofortiger Entfernung der Fibringerinnsel werden in Abständen von 1 Minute je 0,1 ml des Inkubationsgemisches einer Fibrinogenlösung zugegeben und die Gerinnungszeiten bestimmt. Die kürzeste Gerinnungszeit ist ein Maß für die Thrombinaktivität. Die Inkubationszeit in Minuten bis zur Messung der kürzesten Gerinnungszeit wird als Thrombinbildungszeit bezeichnet. Die Schwankungsbreite der Methode und die Normalwerte wurden an 35 Gesunden statistisch ermittelt. Mit diesem Test konnte die Zunahme der Gerinnbarkeit des Blutes während körperlicher Arbeit erkannt werden. Bei Patienten mit einer Lebererkrankung sowie während einer Behandlung mit Dicumarin-Präparaten waren signifikante Verminderungen der Thrombinaktivität nachweisbar. Der Thrombinbildungstest wird daher als Leberfunktionsprobe empfohlen und auch zur Überwachung einer Antikoagulantientherapie. Schließlich wird die Frage diskutiert, mit diesem Test die Aktivität des Thrombozytenfaktors 3 zu erfassen. The author's thrombin-formation test (based on the work by MacFarlane and Biggs, and Pitney and Dacie) is described. After centrifugation (at 1000 r.p.m. for 3 min.), thrombocyte-containing oxalated plasma is diluted with buffer of pH 6.7, calcium chloride is added, and the mixture incubated at 37° C in siliconized glass tubes. The fibrin clot is immediately removed on forming (within 4—6 min.) and 0.1 ml. of the incubation mixture is added to a solution of fibrinogen every minute, and the coagulation time determined. The minimum coagulation time obtained in this manner is a measure of thrombin activity. The incubation time (in minutes) until the measuring of the coagulation time, is called the thrombin-formation time. — The variability and normal range of the method was determined statistically, based on data obtained from tests performed on the blood of 35 normal subjects. Significant deviations from normal were noted in persons with liver disease and those being treated with anticoagulants (dicoumarol or its derivatives). The thrombin-formation test is therefore recommended as a liver function test and, possibly, in the control of anticoagulant treatment. The question is discussed whether the test might not be suitable for measuring the activity of thrombocyte factor 3. Sobre la importancia clínica del test de formación de trombina El test de la formación de trombina se lleva a cabo bajo condiciones standard de la siguiente manera: el plasma oxalatado que contiene trombina, obtenido mediante centrifugación suave, se diluye con una solución tampón a pH 6,7 se añade cloruro calcico y la mezcla se incuba a 37° en tubos de cristal siliconado. Se extraen rápidamente los coágulos de fibrina que se van formando y se añaden, con intervalos de 1 minuto, 0,1 ml cada vez de la mezcla incubada a una solución de fibrinógeno, determinándose a seguida el tiempo de coagulación. El tiempo de coagulación más corto es un índice de la actividad trombínica. El tiempo de incubación en minutos hasta la medida del tiempo de coagulación más corto se denomina tiempo de formación de la trombina. Se comunican los valores normales y la amplitud de la variación del método sobre la base del estudio estadístico de los resultados obtenidos en 35 personas normales. Con este test puede demostrarse el aumento de coagulabilidad de la sangre que tiene lugar tras el trabajo corporal. Se comprueban disminuciones significativas de la actividad trombínica en pacientes afectos de hepatopatías y durante un tratamiento con un preparado dicumarínico. Se recomienda por tanto el test de formación de la trombina como índice funcional hepático y se apunta la posibilidad de su empleo en el control de la terapéutica con anticoagulantes. Finalmente se discute el problema de si con este test puede extraerse una conclusión acerca de la actividad del factor 3 de las plaquetas.