Cytoplasmic actomyosin fibrils in tissue culture cells

Abstract

A special cell line derived from a rat mammary adenocarcinoma (RMCD cells) displays a distinct pattern of actomyosin fibrils (AM fibrils) visible with phase contrast, Nomarski interference and polarized light optics. It was shown that the cytoplasmic AM fibrils are arranged as bundles of highly parallel F-actin filaments. The chemical nature of the filaments was identified by incubation with heavy meromyosin from rabbit skeletal muscle. These cytoplasmic actomyosin fibrils actively contract under isotonic conditions. This was shown by contraction experiments under polarized light optics, by cinematographic analysis and by direct proof of the contractility of AM fibrils isolated by laser micro-dissection. Thus, cytoplasmic AM fibrils can be assumed to represent structures essential for motive force generation in contraction processes in non-muscle cells. Eine besondere Zellinie, die von einem Ratten-Mamma-Adenocarcinom stammt, entwickelt ein deutliches Muster von Actomyosin-Fibrillen (AM-Fibrillen), die im Phasenkontrast-, im Nomarski-Interferenz-kontrast- und im Polarisations-Mikroskop sichtbar sind. Die cytoplasmatischen AM-Fibrillen bestehen aus Bündeln von stark parallelisierten F-Actin-Filamenten. Die chemische Identität der Filamente wurde durch Inkubation mit schwerem Meromyosin (heavy meromyosin, HMM) vom quergestreiften Kaninchenmuskel nachgewiesen. Die cytoplasmatischen AM-Fibrillen kontrahieren aktiv unter isotonischen Bedingungen. Diese Fähigkeit wird belegt durch Kontraktionsexperimente bei polarisationsmikroskopischer Darstellung, durch kinematographische Analyse und durch direkte Sichtbarmachung der Kontraktion von AM-Fibrillen, die mit einer Laser-Mikro-Präparationsmethode isoliert wurden. Cytoplasmatische AM-Fibrillen müssen deshalb als Strukturen angesehen werden, die wesentlich für die Triebkrafterzeugung im Rahmen der Motilität nichtmuskulärer Zellen sind.