Isolierung und Charakterisierung des Plazenta-Proteins PP1

Abstract

The purification and characterization of the placental protein PP₁ is described. The protein has been isolated from an aqueous extract of human term placentae using salt and ethanol fractionation procedures, gel filtration, preparative zone electrophoresis and chromatography on hydroxylapatite. PP₁ sediments with 8.4 S and has a molecular weight of 160,000 daltons; it is composed of apparently four identical subunits, which have a molecular weight of 40,000±2000 daltons and are held together by non-covalent bonds. PP₁ is a glycoprotein with a carbohydrate content of 2.7% and has the electrophoretic mobility of anα ₁-globulin. Immunochemical methods were used for the detection and quantitative determination of the protein. PP₁ is not found in normal plasma or in erythrocytes; neither could it be detected in sera from pregnant women nor in sera from patients suffering from malignant diseases. PP₁ is a tissue protein, but not specific for the placenta; it is also found in other human tissues. The average amount of PP₁ extracted from one human term placenta was determined to be around 3 mg. Immunofluorescent studies revealed that the protein is located in the cytoplasma of the syncytium as well as in the stroma of the villi. Beschrieben wird die Reinigung und Charakterisierung des Plazenta-Proteins PP₁. Bei der Isolierung aus dem Extrakt menschlicher Plazenten wurden Rivanol, Ammoniumsulfat und Äthanol als Fällungsmittel verwendet; weitere Schritte zur Reinigung des Proteins waren Gelfiltration, präparative Zonenelektrophorese und Chromatographie an Hydroxylapatit. PP₁ sedimentiert mit 8,4 S und hat ein Molekulargewicht von 160000; es ist offensichtlich aus vier identischen Untereinheiten, die ein Molekulargewicht von 40 000±2000 haben und durch Nebenvalenzkräfte zusammengehalten werden, aufgebaut. PP₁ ist ein Glykoprotein und hat einen Kohlenhydratgehalt von 2,7%; seine elektrophoretische Beweglichkeit entspricht der einesα ₁-Globulins. Nachweis und Bestimmung des Proteins erfolgten mit immunologischen Methoden. Im normalen Plasma und in Erythrozyten kommt PP₁ nicht vor; auch in Seren von schwangeren Frauen und in Seren von Patienten mit malignen Tumoren konnte PP₁ nicht nachgewiesen werden. PP₁ ist ein Gewebsprotein, aber nicht spezifisch für die Plazenta; es kommt auch in anderen Organen des Menschen vor. Aus einer reifen menschlichen Plazenta lassen sich im Durchschnitt etwa 3 mg PP₁ extrahieren. Aufgrund von Immunfluoreszenzstudien ist das Protein offenbar im Cytoplasma der Trophoblastzellen lokalisiert, und zwar sowohl im Syncytium als auch im Zottenstroma.